牛血清的储存及蛋白提取
2019-01-04
血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等。
胎牛血清应取自剖腹产的胎牛；新牛血清取自出生24小时之内的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少，所以胎牛血清是品质最高的。
储存条件：
血清一般储存于－20℃，同时应避免反复冻融。购买大包装的血清后，首先要灭活处理，然后分装成小包装，储存于－20℃，使用前融化。融化时最好现置于4℃。融化后的血清在4℃不宜长时间存放，应尽快使用。
牛血清蛋白热乙醇法提取工艺：
1、分离血浆、取新鲜牛血放入制冷功能离心机中，加入血量的10%的浓度为3.8%的枸橼酸钠、离心温度2°C以下，分离血浆、血球、收集血浆、血球另用。
2、将血浆放入夹层反应罐内、夹层内加热水，边加热水边加入牛血清容积的0.2-0.3%的辛酸钠、缓慢搅拌、温度在55°C-65°C,溶解后调PH值、加入浓度为1摩尔的盐酸、将PH调至4.6.5然后加入血清总量的5.5%的浓度为95%的乙醇、过滤滤渣去掉。
3、脱盐和浓缩、将滤液用20000分子量以下的超滤器洗脱盐类及其它小分子杂志同时进行浓缩。
4、冻干、将浓缩液按冻干即将浓缩液迅速冷冻至-40°C、持续1小时左右，升到-25°C、持续10-20小时再缓慢升温到0°C再持续1-4小时升温保存温度20°C为成品。
胎牛血清应取自剖腹产的胎牛；新牛血清取自出生24小时之内的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少，所以胎牛血清是品质最高的。
储存条件：
血清一般储存于－20℃，同时应避免反复冻融。购买大包装的血清后，首先要灭活处理，然后分装成小包装，储存于－20℃，使用前融化。融化时最好现置于4℃。融化后的血清在4℃不宜长时间存放，应尽快使用。
牛血清蛋白热乙醇法提取工艺：
1、分离血浆、取新鲜牛血放入制冷功能离心机中，加入血量的10%的浓度为3.8%的枸橼酸钠、离心温度2°C以下，分离血浆、血球、收集血浆、血球另用。
2、将血浆放入夹层反应罐内、夹层内加热水，边加热水边加入牛血清容积的0.2-0.3%的辛酸钠、缓慢搅拌、温度在55°C-65°C,溶解后调PH值、加入浓度为1摩尔的盐酸、将PH调至4.6.5然后加入血清总量的5.5%的浓度为95%的乙醇、过滤滤渣去掉。
3、脱盐和浓缩、将滤液用20000分子量以下的超滤器洗脱盐类及其它小分子杂志同时进行浓缩。
4、冻干、将浓缩液按冻干即将浓缩液迅速冷冻至-40°C、持续1小时左右，升到-25°C、持续10-20小时再缓慢升温到0°C再持续1-4小时升温保存温度20°C为成品。
沪公网安备31012002004473号
