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2018-12-20
Tris饱和酚是用Tris-Cl pH8.0饱和过的重蒸酚,为浅黄色透明液体,有刺激性气味,上层为Tris盐酸缓冲液,pH>7.8。虽然现在有现成产品出售,但是还是要掌握tris饱和酚配制方法。下面就详细介绍配制步骤和方法。
Tris饱和酚:
1、冰箱取出重蒸酚,室温放置---68度水浴溶化,切勿立即放入68度的水浴中,以防玻璃炸裂;
2、加8-羟基喹啉至0.1%和β-巯基乙醇至0.2%,(原液14. 4MOL/ML),混匀,溶液呈现黄色,倒入分液漏斗中(也可在烧杯中进行);
3、加入等溶剂的1MOL/ML的Tris(PH8.0),反复混匀后,静至分层;放出下层黄色酚液,弃上层;
4、加固体Tris约1g/100ml酚,摇匀,去水相;
5、加0.1MOL/MLTris(PH8.0)平衡数次,至PH为8.0;
6、加0.1MOL/MLTris(PH8.0)于棕色瓶中4度保存;
7、如黄色消失或呈粉红色,则不能使用。
提醒各位老师和同学,Tris饱和酚为有毒、刺激性物体,需要在通风橱中操作。
 
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