红细胞裂解液配制注意事项
2020-10-10
裂解液:ACK裂解液作用更柔和些
注意事项:
(1) 裂解液如果放在冰箱里,一定要预热,37度即可。裂解期间试管也可水浴,但如果是夏天室温比较高则不必;
(2) 裂解5min后立刻离心(从所有管都混匀后计时间);
(3) PBS离心洗涤2次;
(4) 裂解液pH值很重要,最好一次不要配多,时间长效果不好,一次配100mL,
避光保存。
2.离心速度:800-1000rpm,5min
3.研磨轻柔很重要
4.培养淋巴细胞的最佳培养液是RPMI 1640,因为是原代细胞,要用10%胎牛血清。还有非常重要的一点,要想让细胞增殖得好,必须加二巯基乙醇(beta-2ME)
5.细胞密度1-2X10^6/mL
注意事项:
(1) 裂解液如果放在冰箱里,一定要预热,37度即可。裂解期间试管也可水浴,但如果是夏天室温比较高则不必;
(2) 裂解5min后立刻离心(从所有管都混匀后计时间);
(3) PBS离心洗涤2次;
(4) 裂解液pH值很重要,最好一次不要配多,时间长效果不好,一次配100mL,
避光保存。
2.离心速度:800-1000rpm,5min
3.研磨轻柔很重要
4.培养淋巴细胞的最佳培养液是RPMI 1640,因为是原代细胞,要用10%胎牛血清。还有非常重要的一点,要想让细胞增殖得好,必须加二巯基乙醇(beta-2ME)
5.细胞密度1-2X10^6/mL