MS培养基配置操作步骤
MS固体培养基可用于诱导愈伤组织,也可用于胚、茎段、茎尖及花药的培养,液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显的成功。
MS培养基的无机养分的数量和比例比较合适,足以满足植物细胞在营养上和生理上的需要。因此,一般情况下,不用再添加氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有机附加成分。和其它培养基的基本成分相比,MS培养基中的硝酸盐、钾和铵的含量高,这是它的显著特点。
培养基配置步骤:
1、融化琼脂用粗天平分别称取琼脂9g蒸糖30g,放入1000ml的搪瓷量杯中,再加入蒸馏水750mL用电炉加热边加热边用玻璃棒搅拌,直到液体呈半透明状。然后在将配好的混合培养液加入到煮沸的琼脂中,最后加蒸馏水定容至1000mL搅拌均匀,
2、在加热琼脂、制备培养基的过程中,操作者千万不能离开,否则沸腾的琼脂外溢,就需要重新称量、制备。此外、如果没有搪瓷量杯,可使用大烧杯代替。但要注意大烧杯底外表面不能沾水,否则加热时烧杯容易炸裂,使溶液外溢,造成烫伤。
3、PH用滴管吸取物质的量浓度为1mol/L的NaOH溶液,逐滴滴入融化的培养基中,边滴边搅拌,直到培养基PH为5.8。
4、培养基的分装、融化的培养基应趁热分装,分装时、现将培养基倒入烧杯中,然后将烧杯中的培养基倒入锥形(50mL或100mL)瓶中。注意不要让培养基沾到瓶口和瓶壁上,锥形瓶中培养基的量约为锥形瓶容量的1/5-1/4.每1000mL培养基可分装25-30瓶。