Wb实验前三个同一个样同样的上样体积,actin条带为什么会宽
2024-09-19
actin条带为什么会宽:
第一:宽可能是由于上样量过大,适量降低一下上样量。
第二:电泳时间过长,如果电泳时间过长,蛋白可能会扩散,导致条带变宽。
前三个为什么不一致:
可能是操作问题导致,注意移液枪和加样手法。
彩虹预染低分子量蛋白 marker(2.7-40kDa)
货号:AC91225
规格:250μL
保存:-20℃保存,有效期 2 年
运输条件:冰袋运输。收到后请及时放到储存条件下储存。
产品组成: 62.5 mM Tris-H3PO4, pH7.5, 2mM EDTA, 2 % (W/V) SDS, 33 % (W/V) Glycerol, 5mM DTT,0.02 % (V/V) proclin300
产品介绍: AC91225 彩虹预染低分子量蛋白 marker 包含了从 2.7kDa 到 40kDa 共 9 种高度纯化并预染 的重组蛋白质(2.7, 4.2, 6.5, 10, 15, 20,25, 30, 40kDa),其中 40kDa 条带为橙红色, 10kDa 为绿色。标示表观分子量经过 thermo26632 非预染蛋白质分子量标准标定。适合作为 SDS-PAGE 和 Western 的蛋白质分子量标准。
本彩虹预染低分子量蛋白 marker 已经配制在 1×SDS-PAGE 上样缓冲液中,直接使用,不要 煮沸、稀释和加入还原剂处理。 根据上样孔的大小,本彩虹预染低分子量蛋白 marker 通常每次上样 5-10 微升(5×1.5mm 胶孔 5-10ul 足够),即可在电泳时、电泳后和转膜后观察到非常清楚的蛋白条带。
注意:
1.注意电泳时间,低分子量蛋白可能会泳动出蛋白胶前沿。
2.Western blot 时需要注意小分子特殊性,特别对于小于 3kDa 的条带,容易穿膜而 过。另外建议转膜液不添加 SDS,若实验必须使用,建议 SDS 浓度不要超过 0.02-0.04%。
3. 预染蛋白质在不同的缓冲体系下有不同的表观分子量,如果在该缓冲体系中事先用非 预染蛋白质标定,可以大致确定蛋白质分子量
第一:宽可能是由于上样量过大,适量降低一下上样量。
第二:电泳时间过长,如果电泳时间过长,蛋白可能会扩散,导致条带变宽。
前三个为什么不一致:
可能是操作问题导致,注意移液枪和加样手法。
彩虹预染低分子量蛋白 marker(2.7-40kDa)
货号:AC91225
规格:250μL
保存:-20℃保存,有效期 2 年
运输条件:冰袋运输。收到后请及时放到储存条件下储存。
产品组成: 62.5 mM Tris-H3PO4, pH7.5, 2mM EDTA, 2 % (W/V) SDS, 33 % (W/V) Glycerol, 5mM DTT,0.02 % (V/V) proclin300
产品介绍: AC91225 彩虹预染低分子量蛋白 marker 包含了从 2.7kDa 到 40kDa 共 9 种高度纯化并预染 的重组蛋白质(2.7, 4.2, 6.5, 10, 15, 20,25, 30, 40kDa),其中 40kDa 条带为橙红色, 10kDa 为绿色。标示表观分子量经过 thermo26632 非预染蛋白质分子量标准标定。适合作为 SDS-PAGE 和 Western 的蛋白质分子量标准。
本彩虹预染低分子量蛋白 marker 已经配制在 1×SDS-PAGE 上样缓冲液中,直接使用,不要 煮沸、稀释和加入还原剂处理。 根据上样孔的大小,本彩虹预染低分子量蛋白 marker 通常每次上样 5-10 微升(5×1.5mm 胶孔 5-10ul 足够),即可在电泳时、电泳后和转膜后观察到非常清楚的蛋白条带。
注意:
1.注意电泳时间,低分子量蛋白可能会泳动出蛋白胶前沿。
2.Western blot 时需要注意小分子特殊性,特别对于小于 3kDa 的条带,容易穿膜而 过。另外建议转膜液不添加 SDS,若实验必须使用,建议 SDS 浓度不要超过 0.02-0.04%。
3. 预染蛋白质在不同的缓冲体系下有不同的表观分子量,如果在该缓冲体系中事先用非 预染蛋白质标定,可以大致确定蛋白质分子量