Western blot跑细胞PPARd蛋白却有杂带？
2024-09-12
细胞裂解不充分：
可能导致部分蛋白未完全释放出来，同时也可能使一些杂质未能充分去除，从而在后续实验中出现杂带。你可以尝试优化裂解条件，如调整裂解液的成分、增加裂解时间或提高裂解温度等。
确保使用合适的蛋白酶抑制剂，防止蛋白在裂解过程中被降解，产生杂带
蛋白提取过程中引入杂质：
在提取蛋白时，可能会混入其他细胞成分，如核酸、多糖等。这些杂质可能会干扰蛋白的分离和检测，产生杂带。你可以在提取蛋白后进行适当的纯化步骤，如离心、过滤或使用特定的纯化yabo官网手机版 盒。
高效RIPA裂解液(组织/细胞)（货号: AC13971） 组织活细胞本产品配有一支PMSF（0.3ml/1.5ml），PMSF请于-20℃保存。
注意事项 ：
本yabo官网手机版 为强烈型裂解液，可以提取核蛋白，但在提取核蛋白的同时，也会将基因组一并释放出来，造成细胞裂解液粘稠，此时可以直接加入蛋白上样缓冲液，煮沸再离心，离心后直接上样电泳；
若想测定浓度，可入加少量 SDS（1%），煮沸后离心测浓度。
本系列蛋白提取yabo官网手机版 所提取的蛋白由于含有去污剂，所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定yabo官网手机版 盒，请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物，随后离心取上清用于后续实验。
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