DPPH还原能力测试方法
2024-02-27
DPPH是一种很稳定的氮中心的自由基，它的稳定性主要来自3个苯环的ππ共-轭作用及空间障碍，使夹在中间的氮原子上不成对的电子不能发挥其应有的电子成对作用。
作为一种稳定的自由基，DPPH可以捕获清除其他的自由基。
因此通过加入DPPH后观察某一化学反应的速率是否减慢，来作为这一反应是否具有自由基反应本质的指标。
DPPH自由基在以300-400之间为中心处具有强烈的吸收，在溶液中呈现深紫色，并且在被中和之后会变为无色或浅黄色。
这一特性可以直观地检测反应的过程，通过记录DPPH在在520nm吸光度值或者EPR信号的变化可以得到初始自由基的量。
DPPH还原能力的测定步骤：
1. 10mL离心管中分别加入0.2mol/L pH 6.6的磷酸缓冲液2.5mL和不同浓度（2，4，6，8mg/mL）的溶液1mL和2.5 mL 1%铁氰化钾，混合均匀后于50℃反应20min。
2. 取出后加入2.5mL 10%三氯乙酸终止反应，5000r/min离心10min。
取上清液2.5mL，加入2.5mL蒸馏水和0.5mL FeCl3，混匀后静置10min，在700nm处检测吸光值。Vc作为阳性对照。
作为一种稳定的自由基，DPPH可以捕获清除其他的自由基。
因此通过加入DPPH后观察某一化学反应的速率是否减慢，来作为这一反应是否具有自由基反应本质的指标。
DPPH自由基在以300-400之间为中心处具有强烈的吸收，在溶液中呈现深紫色，并且在被中和之后会变为无色或浅黄色。
这一特性可以直观地检测反应的过程，通过记录DPPH在在520nm吸光度值或者EPR信号的变化可以得到初始自由基的量。
DPPH还原能力的测定步骤：
1. 10mL离心管中分别加入0.2mol/L pH 6.6的磷酸缓冲液2.5mL和不同浓度（2，4，6，8mg/mL）的溶液1mL和2.5 mL 1%铁氰化钾，混合均匀后于50℃反应20min。
2. 取出后加入2.5mL 10%三氯乙酸终止反应，5000r/min离心10min。
取上清液2.5mL，加入2.5mL蒸馏水和0.5mL FeCl3，混匀后静置10min，在700nm处检测吸光值。Vc作为阳性对照。
沪公网安备31012002005909号
