革兰氏染色的工作原理
2023-09-19
革兰氏染色方法基于某些细菌细胞壁中肽聚糖之间的反应。革兰氏染色包括给:细菌染色,用染剂固定颜色,使细胞脱色,并进行复染。
①结晶紫与肽聚糖结合,将细胞染成紫色。革兰氏阳性细胞和革兰氏阴性细胞的细胞壁中都含有肽聚糖,所以最初,所有细菌都会染成紫色。
②碘和碘化钾用作染色剂或固定剂。革兰氏阳性细胞形成结晶紫碘复合物。
③用酒精或丙酮使细胞脱色。革兰氏阴性细菌的细胞壁中的肽聚糖要少得多,因此这一步骤基本上使其无色,而革兰氏阳性细胞中只有一些颜色被去除,这些细胞含有更多的肽聚糖(细胞壁的60-90%)。革兰氏阳性细胞的厚细胞壁在脱色步骤中脱水,导致细胞收缩,并将染色碘复合物滞留在细胞内。
脱色步骤后,应用复染(通常是藏红,但有时是紫红色)将细菌染成粉红色。革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都会染上粉红色的污渍,但在革兰氏阳菌的深紫色上看不到。如果正确执行染色程序,革兰氏阳性菌将为紫色,而革兰氏阴性菌将为粉红色。
①结晶紫与肽聚糖结合,将细胞染成紫色。革兰氏阳性细胞和革兰氏阴性细胞的细胞壁中都含有肽聚糖,所以最初,所有细菌都会染成紫色。
②碘和碘化钾用作染色剂或固定剂。革兰氏阳性细胞形成结晶紫碘复合物。
③用酒精或丙酮使细胞脱色。革兰氏阴性细菌的细胞壁中的肽聚糖要少得多,因此这一步骤基本上使其无色,而革兰氏阳性细胞中只有一些颜色被去除,这些细胞含有更多的肽聚糖(细胞壁的60-90%)。革兰氏阳性细胞的厚细胞壁在脱色步骤中脱水,导致细胞收缩,并将染色碘复合物滞留在细胞内。
脱色步骤后,应用复染(通常是藏红,但有时是紫红色)将细菌染成粉红色。革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都会染上粉红色的污渍,但在革兰氏阳菌的深紫色上看不到。如果正确执行染色程序,革兰氏阳性菌将为紫色,而革兰氏阴性菌将为粉红色。