1.取2克材料，洗涤并切碎，放入研钵中，然后放入低温冰箱中冷冻30分钟。取出并在冰浴中添加少量石英砂和提取缓冲液（每克鲜重分别以1ml，2ml和4ml两次添加玉米，小麦和大米）。研磨成匀浆，在低温下离心5分钟（4000r / min）。上清液是粗酶提取物。以上操作应尽可能在冰浴中进行。
2.将0.4ml粗酶提取物，1.2ml 0.1mol / L KNO 3磷酸盐缓冲液，0.4ml NADH2溶液倒入准备好的带刻度的试管中，并充分混合，在30℃孵育30分钟，不添加NADH 2。对照，取0.4ml蒸馏水代替。
3.孵育后，立即添加1 ml对氨基苯磺酸溶液以终止反应，添加1 mlα-萘胺溶液，显色20分钟，在台式离心机上离心10分钟，然后测量上清液在分光光度计上在540 nm波长处。
4.标准曲线制作和结果计算与体内方法相同。