TRIzol RNA提取操作步骤
2023-04-20
1.样品处理：
培养细胞：收获细胞1-5×107，转移1.5ml离心管在其中，加入1ml Trizol，混合均匀，在室温下静置5分钟。
组织：取50-100mg组织（新鲜或-70℃，组织保存在液氮中）置于1.5ml离心管中，加1ml Trizol充分匀浆，在室温下静置5min。
2.加入0.2ml氯仿，振摇15s，静置2min。
3.4℃离心12000g×15min，取上清液。
4.加入0.5ml异丙醇，将试管中的液体轻轻混合，然后在室温下静置10分钟。
5.4℃离心12000g×10min，弃去上清液。
6.加入1ml的75％乙醇，轻轻洗涤沉淀。 4℃7500g×5min，弃去上清液。
7.干燥，加入适量的DEPC H2O溶解（65℃10-15分钟）。
培养细胞：收获细胞1-5×107，转移1.5ml离心管在其中，加入1ml Trizol，混合均匀，在室温下静置5分钟。
组织：取50-100mg组织（新鲜或-70℃，组织保存在液氮中）置于1.5ml离心管中，加1ml Trizol充分匀浆，在室温下静置5min。
2.加入0.2ml氯仿，振摇15s，静置2min。
3.4℃离心12000g×15min，取上清液。
4.加入0.5ml异丙醇，将试管中的液体轻轻混合，然后在室温下静置10分钟。
5.4℃离心12000g×10min，弃去上清液。
6.加入1ml的75％乙醇，轻轻洗涤沉淀。 4℃7500g×5min，弃去上清液。
7.干燥，加入适量的DEPC H2O溶解（65℃10-15分钟）。
沪公网安备31012002005909号
